GeneChip® WT (Whole Transcript) cDNA Synthesis and Amplification Kit は、GeneChip® WT Sense Target (ST) Labeling Assay の最初のステップに使えるよう最適化された試薬キットです。
WT cDNA Synthesis and Amplification Kitは、途中のin vitro転写増幅の行程だけでなく、first-cycle およびsecond-cycle cDNA 合成反応のステップもサポートしています。
必要な出発材料は、1μgのtotal RNAです。このtotal RNAは、相補的な検出感度を増大させるため、rRNAの大部分を取り除くRiboMinusTM Human/Mouse Transcriptome Isolation Kit*で処理されます。(*本製品には含まれません。別途、Invitrogen社よりご購入ください。) WT cDNA Synthesis and Amplification Kitで得られる産物はランダムプライマーから合成された、順方向の一本鎖DNAです。そのまま、GeneChip® WT Terminal Labeling Kit(アフィメトリクス社で別途販売)を使って断片化および標識のステップに進むことができます。
100ngのtotal RNAを出発材料にした、別の方法も利用できます。
キットの内容 (本キットは2つのパッケージで構成されています。以下は、各パッケージのコンポーネントと、反応数による各コンポーネントの容量です。)
T7-(N)6 Primers, 2.5 µg/µL
※ WT cDNA Synthesis and Amplification Kitは、GeneChip® WT Sense WT Sense Target Labeling and Control Reagents Kit (製品番号900652)の コンポーネントの一部として含まれています。